浸提液法（提取法）是最常用的细胞毒性测试方法，适用于大多数医疗级 TPE 材料，尤其适合评估材料释放的可溶性毒性物质。该方法的核心是通过浸提过程模拟材料在体内的降解释放行为，具体步骤如下：首先按标准要求制备 TPE 试样，切割成规定尺寸（通常表面积与浸提液体积比为 6cm²/mL），去除表面污染物后，选用合适的浸提液（如含血清的 MEM 培养基、生理盐水或 DMSO 溶液），在 37℃±1℃条件下浸提 24 小时 ±2 小时，获得材料浸提液。随后将浸提液与 L929 小鼠成纤维细胞（或其他指定细胞株）共培养，培养时间通常为 24 小时、48 小时或 72 小时，通过显微镜观察细胞形态变化（如是否出现溶解、皱缩、脱落），并采用 MTT 法、CCK-8 法等定量检测细胞相对增殖率（RGR）。判断标准为：RGR＞100% 为无毒性，70%~100% 为轻微毒性，50%~69% 为中度毒性，＜50% 为重度毒性，医疗级 TPE 材料需达到 RGR＞70% 才算通过测试。

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  直接接触法适用于评估具有一定形状和硬度的 TPE 制品（如密封垫圈、小型部件），可直接观察材料与细胞的接触反应。测试时，将灭菌后的 TPE 试样直接放置在长满 L929 细胞的培养皿中，试样与细胞层接触面积不超过培养面积的 50%，避免影响细胞营养交换。共培养 24 小时～72 小时后，观察试样周围细胞的生长状态，重点关注接触区域是否出现细胞死亡、抑制带或形态异常。该方法的优势是模拟材料与组织直接接触的场景，但需确保试样无菌且不释放影响培养环境的物质（如 pH 值变化、渗透压异常），若 TPE 材料吸水性强或易溶胀，可能干扰测试结果，需谨慎选用。?

 

  间接接触法（琼脂扩散法 / 滤膜扩散法）适用于评估可能释放挥发性或低分子量毒性物质的 TPE 材料，通过物理屏障避免材料与细胞直接接触，仅让毒性物质扩散至细胞层。琼脂扩散法中，在细胞层上方铺设一层琼脂糖凝胶，将 TPE 试样放置在凝胶表面，培养后观察凝胶下方细胞是否出现毒性反应区域（如细胞溶解带）；滤膜扩散法则通过微孔滤膜分隔试样与细胞，允许小分子毒性物质透过滤膜作用于细胞。两种方法均通过观察细胞毒性反应的范围和程度判断毒性等级，若出现明显的细胞死亡区域，说明材料存在可扩散的毒性物质，需进一步优化配方。?

 

  此外，还有一些补充测试方法用于特殊场景。如流式细胞术可定量分析细胞凋亡率，评估材料对细胞存活的潜在影响；乳酸脱氢酶（LDH）释放试验通过检测细胞培养液中 LDH 的含量，反映细胞 membrane 损伤程度，辅助判断细胞毒性类型（如坏死性毒性）。对于可降解医疗级 TPE 材料，还需进行动态浸提测试，模拟材料降解过程中的毒性物质释放曲线，评估不同降解阶段的细胞毒性变化。?

 

  无论采用哪种方法，测试过程均需严格控制变量：试样制备需标准化（如尺寸、表面处理），浸提条件需根据材料特性选择（如高温加速浸提适用于耐高温 TPE），细胞培养环境需稳定（温度、CO?浓度、湿度），并设置阴性对照（如高密度聚乙烯浸提液）和阳性对照（如 0.1% 苯酚溶液）验证测试体系有效性。只有通过多种方法的综合评估，才能全面准确地判断医疗级 TPE 材料的细胞毒性风险，确保其在医疗场景中的使用安全性。